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NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA簡介

發布時間: 2024-02-04  點擊次數: 378次

NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA包含嵌合慢病毒顆粒 (LVP),其中人類免疫缺陷病毒 (HIV-1) 基因已被武漢一號 SARSCoV-2 分離株的基因取代。在世衛組織國際合作研究中,該制劑與世衛組織 SARS-CoV-2 RNA 國際標準同時進行了評估 (1)。工作試劑的預期用途是作為檢測 SARS-CoV-2 RNA 的核酸擴增技術 (NAT) 檢測中的二級標準或陽性對照。


NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA作為建立 WHO SARSCoV-2 RNA 國際標準(NIBSC 目錄號 20/146)的合作研究的一部分進行了校準,發現其單位為 6.73 Log10 IU/mL ,當在 0.5mL 分子級水或 PBS 中復溶時,95% 的置信限為 6.58 至 6.88。


每瓶NIBSC 20/138含有 0.5mL 凍干、非傳染性、合成 SARS-CoV-2 RNA,包裝在 HIV-1 顆粒中。已將單核苷酸突變隨機插入到 SARS-CoV-2 RNA 序列中以防止蛋白質表達,并且通過將 SARS-CoV-2 基因組分成四個重疊片段來制備材料。

嵌合 LVP 在通用緩沖液中等摩爾配制,該緩沖液包含 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、0.5% 人血清白蛋白和 1% D-(+)- 海藻糖脫水物,背景為 1x10^5人類基因組 DNA 的拷貝數/mL。包含 SARS-CoV-2 RNA 的四種嵌合 LVP 的完整共有序列保存在 GenBank 登記號 MW059032、MW059033、MW059034、MW059035 下。


NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA材料應在 0.5 mL 分子級水或 PBS 中復溶。添加后,安瓿應在環境溫度下放置 20 分鐘,然后混合,避免產生過多的泡沫。重構后,應將 20/138 稀釋到適合所用材料/測定的基質中。


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